高压灭菌的灭菌功效验证

微生物实验室中最重要的仪器之一是灭菌器，高压蒸汽灭菌器（高压蒸汽灭菌器）是最常用的。根据GB 4789.1-2016，应定期检查和/或校准实验室设备（带有检查标签），维护和维修，以确保正确的性能和操作安全。但是，您的高压釜是否经过了此类检查？而且，如果您想执行验证，应该如何做？今天，我们将总结用于验证高压灭菌疗效的关键方法。

高压灭菌灭菌功效的验证通常包括诸如化学指示器，最大温度计，自制温度管和生物学指标之类的方法。尽管这些方法具有相似的原理 - 依据确认灭菌器在灭菌过程中是否达到所需的温度 - 您可以根据实验室的特定条件选择一种或多种。

1。化学指标方法

原理：化学指标在特定温度和时间条件下会发生颜色或形状变化。此变化用于确定是否满足了灭菌参数。

实验室中常用的物品是3M高压灭菌指示胶带，在灭菌后会改变颜色。该胶带由热敏化的化学品，颜色开发人员和油漆材料制成，并在胶带上以条纹图案印刷。它直接应用于灭菌包装的外部，最小长度为5 cm。轻轻按下胶带，以确保良好的粘附和密封。在暴露于121°C 20分钟或130°C下4分钟后，胶带上的对角白色条纹应完全变黑。如果颜色变化不均匀或不完整，则包装被认为未正确消毒。

2。最大温度计方法

原理：此方法使用的汞温度计与传统的医疗温度计相似，该温度计不会返回较低的温度。它表明在灭菌过程中达到的最高温度。

要进行验证，请将汞温度计放入充满水的Erlenmeyer瓶中。在灭菌期间，将烧瓶放在高压釜的上部和下部分。过程结束后，检查温度计的读数是否与所需的温度相匹配。该方法只能验证温度，无法确认是否满足灭菌时间需求，因此它代表了高压釜验证的最低标准。

3。自制温度管法

原理：这种方法利用某些在特定温度下融化和重结晶的化学物质，并具有独特的晶体形式。这些化学物质被密封在小玻璃管中，并放置在高压釜内。灭菌后，检查晶体形状以确定是否达到正确的温度。

苯甲酸通常使用，熔点为121-123°C，与高压釜的标准灭菌温度一致。将固体苯甲酸密封在小玻璃管中，并放入高压灭菌器中。灭菌后，观察到苯甲酸的状态确认是否达到目标温度。像最大温度计方法一样，此方法仅验证温度，而不是灭菌持续时间。

4。生物指标方法

原理：这种方法使用地球杆菌的非致病性孢子作为指示生物，以评估热灭菌的有效性。这些孢子具有高度的耐热性，其耐药性与致病性梭状芽孢杆菌孢子相似，使其成为验证灭菌功效的合适指标。

生物学指标有三种形式：孢子悬浮液，孢子带和综合孢子和中等管。这些通常放置在灭菌容器中的五个位置：下层的前，中和背面以及上层和中层的中心点。灭菌后，将指标接种到溴氯氯葡萄糖肽水中，并在55-60°C下孵育2-7天。如果培养基保持清晰且颜色不变，则孢子被杀死，表明良好的灭菌。如果培养基变成黄色且浑浊，则孢子得以幸存，表明灭菌性能差。孢子悬浮液和孢子条均遵循相同的验证过程。

商业生物指标管也通常用于实验室。它们含有地球杆菌孢子孢子和带有生长培养基的密封玻璃安培。管放置在整个灭菌容器中。高压灭菌后，将玻璃放大器压碎以释放培养基，并在56°C下孵育管，并与阳性对照一起孵育。如果灭菌不足，存活的孢子将生长并变成黄色。如果灭菌是有效的，则孢子被灭活，肉汤保持紫色。

验证频率

目前，关于高压灭菌功效验证频率尚无严格的国家标准。预计实验室将建立自己的验证时间表，并严格遵守他们。考虑到结果的易用性和可靠性，我们建议使用指示胶带与生物指示灯管结合使用，因为它们提供了简单的操作和对灭菌有效性的全面验证。

关于灭菌的注意事项（某些进口的全自动高压灭绝不需要）
使用高压蒸汽灭菌器时，至关重要的是，释放蒸汽时将所有冷空气排出腔室内。只有在关闭排气门的情况下除去所有冷空气之后。如果剩下任何空气，压力表可能表示正确的压力，但是腔室内的实际温度将不足。空气越多，压力和温度之间的差异越大，可能导致不完全灭菌。 （在发酵介质的灭菌期间通常会观察到这一点，那里的气泡保留在小导管中 - 尝试更彻底地用尽冷空气。）